ReadyAMP快速16S rDNA 細菌鑒定試劑盒介紹
更新時間:2023-11-13 點擊次數:394次
試劑盒應用
本試劑盒主要用于細菌16S rDNA 的快速檢測,無需經過繁瑣的基因組DNA 提取純化,取樣后直接PCR 擴增即可獲得16S rDNA 信息,通過比對16S 片段序列,終獲得細菌種屬信息。本試劑盒可以檢測低至104 個/mL 個細菌,對難培養(yǎng)、珍貴樣本、表型不能鑒定的未知細菌快速擴增尤為方便。使用本試劑盒無需提取純化,可直接對菌斑、甘油菌或對數菌進行檢測,從而
大大縮短了檢測時間。試劑盒中提供的16S PCR Premix 已包含有染料,PCR 結束后直接進行瓊脂糖凝膠電泳,PCR 產物可直接進行測序分析。本產品僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等域。
保存條件
-20oC 保存。使用時請置于冰上。
使用方法
1、樣本準備:
1)菌液:取對數菌液1-3 μL 加入PCR 反應體系中。
2)甘油菌:取1μL 菌液加入PCR 反應體系中。
3)單菌落:無菌吸頭或者無菌牙簽挑取單個菌落置于500 μL 無菌生理鹽水中,渦旋混合均勻,取
1-3 μL 加入PCR 反應體系中。
2、推薦PCR 反應體系
4、瓊脂糖凝膠電泳
使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳,不同菌株電泳片段稍微差別,一般為1.5kb 左右。
5、PCR 產物回收和測序
使用切膠回收試劑盒進行回收,并使用以下推薦引物進行測序。將DNA 測序結果與NCBI 數據
庫進行比對,確定細菌種類。
注意事項
1、超凈臺中操作,應佩戴無菌手套,穿實驗服,操作用75%乙醇對實驗器具進行消毒。
2、使用無菌吸頭和離心管,開蓋務必輕柔,減少氣溶膠污染。
3、盡可能使用2 次純化細菌,以提高測序成功率。
4、盡可能使用對數的細菌。
5、為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用。